Só és vízháztartás hatása a vese működésére patkányon - Gyakorlat

Húgyhólyag preparálása

A 114. és 115. ábrán jól látható húgyhólyagot óvatosan kipreparáljuk. Vigyázzunk, hogy a hólyagot a preparálás során, ne vágjuk meg.

8.2. ábra - A húgyhólyag elhelyezkedése

A húgyhólyag elhelyezkedése

Ábra: 1. vese 2. vastagbél 3. méh 4. petefészek 5. húgyhólyag 6. húgycső 7. ureter 8. vena mesenterica 9. art. mesenterica 10. mellékvese

8.3. ábra - A húgyhólyag elhelyezkedése II.

A húgyhólyag elhelyezkedése II.

Ábra: 1. mellékvese 2. vese 3. vese artéría és véna 4. v. mesenterica 5. a. mesenterica 6. ureter 7. petefészek 8. méh 9. mesometrium 10. húgyhólyag 11. húgycső 12. medenceöv 13. hüvely 14. fityma mirigy 15. vulva

Kreatinin-clearance meghatározása

A húgyhólyag kanülálása

1. Altatás uretánnal.

2. Az állatot preparáló asztalra helyezzük.

3. A húgyhólyagba kanült kötünk.

4. A kanülök másik végét pedig 10 ml-es mérőhengerbe rakjuk. Vigyázzunk, hogy a kanül helyzete ne változzék!

Artéria carotis communis preparálása

Lásd.VII.4.3. fejezet.

Kreatinin clearance meghatározásának menete

1.1 órán keresztül gyűjtjük a vizeletet – percdiurezis kiszámítása.

2.1.5 ml vért veszünk az artériából.

3. Centrifugálás: 3000 rpm 10 percig.

4. Kreatinin meghatározása vizeletből és a plazmából:

a. Kreatinin meghatározása plazmából

-1. 0.5 ml plazma + 5 ml desztillált víz

-2. + 5 ml 5%-.os Na-volframát oldat

-3. + 5 ml 2/3 n kénsav (cseppenként adagolva)

-4. 10 perc múlva szűrés

-5. a kristálytiszta Folin-szűrletből 5 ml-t kémcsőbe pipettázunk

-6. + 2ml 0.916%-os pikrinsav - összerázzuk

-7. + 2 ml 3%-os NaOH - összerázni

-8. 20 perc várakozás

-9. fotometrálás 520 nm-nél vak: 5ml víz + 2ml pikrinsav + 2ml NaOH

b. Kreatinin meghatározása vizeletből (Jaffe reakció)

-1. 50 x-es hígítást készítünk a vizeletből

-2. 5 ml higított vizelet + 2 ml pikrinsav + 2 ml 3%-os NaOH

-3. a többi ugyanaz mint a plazmánál

5. Kalibrációs görbe felvétele:

-1. 100 mg%-os kreatinin standard oldatból 100 x -os hígítást készítünk.

-2. Ebből 0.5,1, 2, 3, 4, 5 ml-t kémcsövekbe mérünk.

-3. A bemért mennyiségeket desztillált vízzel 5 ml-re egészítjük ki, a kreatinin koncentráció így: 5,10, 20, 30, 40, 50 mikrog%.

-4. A csövekbe 2ml pikrinsav + 2ml 3%-os NaOH-t rakunk. 5. 520 nm-en fotometrálunk

Értékelés menete

1. A megadott plazma hígítás esetén a mikrog-ban kifejezett kreatinin tartalmat 0.02-dal szorozva kapjuk meg a kreatinin koncentrációt mg %-ban.

2. Az előhígítás fokával (50) való további szorzás adja meg az eredeti (hígítatlan) vizelet koncentrációját.

3. Számítás: C = (U x V) / P, ahol C: clearance , V:vizelet kreatinin mg%, P: plazma kreatinin mg %, U: percdiurézis (1 perc alatt ürített vizelet mennyisége (ml)).

8.1. táblázat -

 Vizelet mennyiségVizelet kreatinin tartalomPlazma mennyiségPlazma kreatinin tartalomClearance
1. állat     
2. állat     

8.2. táblázat -

 0.5 µg kreatinin1 µg kreatinin2 µg kreatinin3 µg kreatinin4 µg kreatinin5 µg kreatinin
1. állat      
2. állat      

Sódiurezis és ozmotikus diurezis előidézése

1. Húgyhólyag kanülözése

8.4. ábra - Húgyhólyag elhelyezkedése

Húgyhólyag elhelyezkedése

Ábra: 1. uterusz 2. húgyhólyag 3. ureter 4. húgycső 5. vagina 6. végbél

V. jugularis preparálása

8.5. ábra - Vena jugularis elhelyezkedése

Vena jugularis elhelyezkedése

Ábra: 1. gége 2. mellékpajzsmirigy 3. pajzsmirigy 4. a. carotis communis 5. n. vagus 6. v. juguláris 7. trachea 8. nyelőcső 9. pajzsmirigy artéria és véna

1. Megkeressük a v. jugulárist.

2. Kipreparáljuk.

3. 2 fonalat vezetünk a!á.

4. A fej felőli végét lekötjük.

5. A test felőli végére érszorítót helyezünk.

6. Az eret megvágjuk, a kanült behelyezzük.

7. A kanül rögzítése után az érszorítót levesszük.

Kísérlet menete

1. Figyeljük a vizeletürítés mértékét 15 percig (cseppszám).

2. 5 ml 37 oC-os fiziológás sóoldat lassan a v. jugulárisba.

3. 20 percig adatgyűjtés (5 perces időközönként).

4. Megvárjuk, míg a fokozott diurézis megszűnik.

5. 1 ml 10 %-os glükóz oldatot adunk a vénába.

6. 20 percig adatgyűjtés.

Értékelés

8.3. táblázat -

 0 perc5 perc10 perc15 perc20 perc
fiz. só     
glükóz     

Só és vízterhelés hatása a vese működésére

Preparálás:

1. Altatás uretánnal.

2. Húgycső kanülálása.

3. Az anyagokat a nyelőcsőbe dugott szondán keresztül adjuk.

Kísérlet menete:

Kezelés:

1. 2 patkány kontroll 2

. 2 patkány 10 ml desztillált víz

3. 2 patkány 10 ml 0.45% NaCl

4. 2 patkány 10 ml 0.9% NaCl

5. 2 patkány 3 ml 4% NaCl

6. 2 patkány 10 ml fenolvörös (0.025)

7. 2 patkány 10 ml 0.54% NaHCO3

Mérjük:

1. vizelet mennyiségét

2. vizelet pH-t

3. megfigyeljük a vizelet színét

4. ozmolaritását (szárazanyag tartalom)

Megfigyelési idő: 3 óra Mérés: 30 percenként

Értékelés

8.4. táblázat -

Kezelés30'60'90'120'150'
pHszamlpHszamlpHszamlpHszamlpHszaml
1.kontroll               
2.10 ml deszt. víz               
3.10 ml 0.45% NaCl               
4.10 ml 0.9% NaCl               
5.3 ml 4% NaCl               
6.10 ml fenolvörörs               
7.10ml 0.54% NaHCO3               

Különböző kémiai anyagok hatása

Preparálás:

- V. jugularis preparálása (lásd fenn)

- Húgyhólyag kanülözése (lásd fenn)

Kísérlet menete:

Kontroll: vizeletmérés 20 percig

1. Acetilkolin (100 mikrog)

2. vizeletmérés (40 percig) 3.

10 perc szünet

4. Adrenalin (100 mikrog)

5. vizelet mérés (40 percig)

6. 10 perc szünet

7. szerotonin (80 mikrog)

8. vizelet mérés (40 percig)

Értékelés:

8.5. táblázat -

 10 perc20 perc30 perc40 perc
Kontroll    
ACh    
Adrenalin    
Szerotonin